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擬南芥培養(yǎng)箱普通的培養(yǎng)和特殊培養(yǎng)方法

瀏覽： 4291| 更新時間：2016-04-26 |

    擬南芥又名阿拉伯芥，屬十字花科，為二年生草本植物。具有植株形態(tài)小，平鋪直徑5cm，高30cm；生長區(qū)域小，易于培養(yǎng)；基因組小，只有5條染色體，15700萬個堿基對，27000個基因；生長速度快，周期短，一個世代大約只需要6周的時間；可自花授粉，也可以在不同種質(zhì)系間雜交，種子多，每株每世代可產(chǎn)數(shù)千粒種子等特點。因此，擬南芥是植物科學(xué)，包括遺傳學(xué)和植物發(fā)育研究中的模式植物之一。在2000年，擬南芥成為了*個基因組被完整測序的植物。
    擬南芥培養(yǎng)箱簡單的培養(yǎng)，可用于基因表達(dá)、器官發(fā)育、基因突變等研究。
    1、首先把擬南芥種子放到濾紙上，用70%酒精進(jìn)行消毒處理，再用*進(jìn)行處理（也可選擇20%漂白劑以及0.05% Triton X-100 非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘）。用無菌水沖洗5遍，然后將種子點到MS培養(yǎng)基上，pH5.9，另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
    2、把種子放到4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右，在長日照或短日照條件下催芽，。利用PLC控制器，編輯簡單的晝夜模式，設(shè)定光照時間16小時（黑暗8小時）或者光照14小時（黑暗10小時）；選配Q23+連續(xù)光強(qiáng)調(diào)節(jié)裝置，設(shè)定光照強(qiáng)度為100-150umol/m2.s;設(shè)定室內(nèi)溫度為光照條件下20-22℃，黑暗條件下18-20℃；選配濕度控制系統(tǒng)，設(shè)定室內(nèi)相對濕度70%。
    3、出苗大約7~10天，然后移入土中培養(yǎng)，采用底部灌溉方式澆水（利用土壤的毛細(xì)作用）。在*次澆水前，可使土壤*干燥，以后每隔7~10天澆一次水。
    4、土壤可用營養(yǎng)土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置，也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長過程中，可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
    5、當(dāng)植株長到一定高度時，可剪斷莖桿，以產(chǎn)生更多的花序，可用于轉(zhuǎn)化研究或者獲得更多的種子。
    擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng)
    為了加快擬南芥生長速度，在移入土壤培養(yǎng)后，可設(shè)定長日照，利用PLC控制器，編輯程序設(shè)定24h光照，光強(qiáng)100-250umol/m2.s，溫度持續(xù)22-23℃。
    擬南芥根系處理培養(yǎng)，可減少光照時間為8-12h，提高光照強(qiáng)度為100-350umol/m2.s，溫度為光照條件下22-23℃，黑暗條件下18-20℃，其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。

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